1. Úvod do bioanalytických metod. Vymezení rozsahu a oblastí oboru. 2. Spektroskopické a fluorescenční metody studia biomolekul (UV-VIS spektroskopie, spektroskopie v infračervené oblasti, fluorescenční spektroskopie), stanovení koncentrace (kvantifikace) proteinů - Biuretová metoda, Lowryho metoda, BCA metoda, Metoda Bradfordové, přímá spektrofotometrická stanovení, Edelhochova metoda, fluorescenční stanovení. 3. Základy enzymologie, stanovení aktivit volných a imobilizovaných enzymů, enzymové metody stanovení analytů, metody stanovení substrátů, aktivátorů a inhibitorů enzymových reakcí. 4. Protilátky. Struktura a funkce antigenů. Příprava monoklonálních, polyklonálních a rekombinantních protilátek, charakterizace a značení. Interakce protilátka - antigen, afinita, specifita, křížové reakce. 5. Imunochemická stanovení - precipitační a neprecipitační imunochemické metody, enzymová imunoanalýza (ELISA), fluorescenční imunoanalýza, radioimunoanalýza (RIA), Western blotting a dot blotting, mikroskopické techniky, FACS - fluorescence activated cell sorting 6. Principy elektroforetických metod - elektroforéza proteinů a DNA, isoelektrická fokusace, kapilární elektroforéza 7. Centrifugační metody v bioanalytice (diferenciální, zonální, izopyknická) 8. Chromatografické metody v bioanalytice (afinitní chromatografie, IEC, RP-LC) 9. Bioanalytické metody v mikrobiologii 10. Hmotnostní spektroskopie biomolekul (MALDI-TOF/MS, ESI-MS) 11. Základy molekulárně-biologických metod (izolace a přečištění DNA, štěpení a ligace DNA, separace DNA, sekvenace DNA a proteinů, syntéza oligonukleotidů a peptidů) 12. Základy genového inženýrství (rekombinantní DNA, klonování DNA, cDNA knihovny, klonovací a expresní vektory, GMO) 13. Molekulárně biologické metody v diagnostice (PCR, FISH, DNA fingerprinting) 14. Metody odběru a přípravy vzorků, správná laboratorní praxe
|
-
A. Manz, N. Pamme & D. Iossifidis. Bioanalytical Chemistry, Imperial College Press, 2007.
-
B. Králová, L. Fukal, P. Rauch, T. Ruml. Bioanalytické metody, Vydavatelství VŠCHT PRAHA, 2001.
-
Curell B.F. et al. Techniques for Engineering Genes. University of Greenwich, London. 1994.
-
I. Němcová a kol. Spektrometrické analytické metody I. Karolinum Praha 2004..
-
Ruml T. Laboratoře z genového inženýrství. VŠCHT. 1997.
-
S.R. Mikkelsen, E. Cortón:. Bioanalytical Chemistry, Wiley Interscience, 2004, ISBN: 978-0-471-54447-0..
-
Vondrejs V. Genové inženýrství I a II. Karolinum, Praha. 2001.
|