1. den: Dopoledne: Obecná přednáška mentora (pro oba kursy): MUDr. L. Bačáková, CSc, FgU AVČR: Úvod do problematiky tkáňového inženýrství obecně a se zaměřením na specifika cévních a chlopenních (či kostních a kloubních) náhrad. Metodická přednáška + ukázky postdoktoranda (pro oba kursy): Základní typy sterilizace vzorků materiálu pro kultivaci, základy izolace a kultivace buněk, jejich nasazení na materiál pro kultivaci v klasickém statickém systému, princip sledování růstu buněk v přístroji xCeLLigence. Odpoledne: Praktická cvičení (pro oba kursy; vede postdoktorand s odbornými pracovníky): manipulace se vzorky materiálů (pokud možno jednoduché malé planární vzorky, např. ve tvaru koleček či čtverečků) - jejich sterilizace, vložení do kultivačních nádob a jejich osazení buňkami, počítání buněk v Bürkerově hematologické komůrce i v automatickém přístroji Vi-CELL Analyser, který zároveň hodnotí i viabilitu buněk. Nasazení různých typů a koncentrací buněk (různé linie endotelových a hladkých svalových buněk, fibroblasty) do senzorických destiček přístroje xCeLLigence Real Time Cell Analyser a uvedení přístroje do chodu. 2. den Dopoledne: Přednáška zvaného lektora: Pro kurs "Tkáňové inženýrství cév a srdečních chlopní": MUDr. Jaroslav Chlupáč, IKEM, Praha): Experimentální endotelizace pletených cévních protéz z polyetyléntereftalátu v dynamickém průtokovém bioreraktoru a jejich následná implantace laboratornímu praseti. Přednáška bude doplněna ukázkami vzorků současně klinicky využívaných cévních protéz i experimentálních umělých materiálů (dodají spolupracující instituce: VŠCHT, ÚMCH AVČR, VÚP a.s., Elmarco s.r.o., IKEM apod.). Pro kurs "Inženýrství kostní tkáně: Ing. Karel Balík, CSc., ÚSMH AV ČR: Kompozitní biologicky inspirované materiály s amorfní, vláknitou a krystalickou složkou pro inženýrství kostní tkáně Metodická přednáška + ukázky postdoktoranda (pro oba kursy): Vizualizace buněk na materiálech (fixace, typy barvení, základy imunoflurescence I). Odpoledne: Praktická cvičení (pro oba kursy; vede postdoktorand a odborní spolupracovníci): Fixace buněk na materiálech, fluorescenční barvení buněk na materiálech (Texas Red, Hoechst), fotografování několika zorných polí, počítání buněk na digitálních fotografiích a měření jejich adhesní plochy počítači obrazovou analýzou (např. Atlas, Tescan). Začátek imunofluorescenčního barvení buněk, a to vybranými primárními protilátkami proti specifickým adhesním či cytoskeletárním proteinům. Buňky v protilátkách zůstanou do dalšího dne. Průběžné sledování růstu buněk v přístroji CeLLigence na monitoru počítače (automatické snímání populační hustoty buněk na základě změn elektrického odporu). 3. den Dopoledne: Přednáška zvaného lektora: Pro kurs "Tkáňové inženýrství cév a srdečních chlopní": RNDr. Eduard Brynda, CSc., ÚMCH AV ČR): Modifikace materiálů pro tkáňové inženýrství cév molekulami extracelulární matrix (ECM), fibrinu a oligopeptidickými ligandy specifickými pro adhesní receptory endotelových a hladkých svalových buněk. Pro kurs "Inženýrství kostní tkáně: Ing. Jaroslav Fencl, firma Beznoska s.r.o., Kladno: "Výroba a povrchové úpravy kostních implantátů, kloubních náhrad a chirurgických nástrojů pro ortopedii ve firmě Beznoska s.r.o., a jejich klinická úspěšnost". Metodická přednáška a ukázky postdoktoranda (pro oba kursy): Základy imunofluorescence II (primární a sekundární protilátky, excitace/emise sond, atd.), základy průtokové cytometrie Odpoledne: Praktická cvičení (pro oba kursy; vede postdoktorand a odborní pracovníci): Pokračování imunofluorescenčního barvení sekundárními protilátkami, snímání buněk fluorescenčním mikroskopem. Barvení fixovaných a nefixovaných buněk propidium iodidem, stanovení obsahu DNA a podílu živých a mrtvých buněk průtokovou cytometrií 4. den Dopoledne: Přednáška zvaného lektora: Pro kurs "Tkáňové inženýrství cév a srdečních chlopní": MUDr. František Straka, IKEM, Praha: Úvod do tkáňového inženýrství srdečních chlopní, ukázky sou
|